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如果一项研究内容需要从自然界中筛选到能产高温蛋白的菌株,你将如何完成?请写出简明试验方案。
发布于2022-02-04 08:27:17
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2
个回答
网友回答
2022-02-04
一般是在土壤中筛选的,具体方法如下: 1、取土壤,晾干,过40目筛,用
无菌水
梯度稀释至0.000001g土/1mL水或0.0000001g土/1mL水,待用 2、配酪素培养基(加琼脂),高压灭菌,倒平板;配
LB培养基
或
发酵培养基
,灭菌,分作液体培养基,另外取一些倒斜面。 3、取1的融入土壤的水1mL涂平板,置于
恒温箱
,于50度或以上培养1~3天,挑选有水解圈(透明圈)的菌落用来划斜面(LB),于50度或以上进行纯化培养。 4、取纯化菌株,于液体LB中扩大培养。 5、离心,取沉淀,
盐析
,透析,得酶液。 6、以
酪蛋白
为底物,测酶液酶活,若酶活较大,则该菌株为你要的菌株了。
网友回答
2022-02-04
很简单啊。首先要确定平板,选取含有氮源,水,生长因子等齐全的平板,注意,碳源只加蛋白质和淀粉。这个题目没说清楚。是筛选的菌株,同时产蛋白酶和淀粉酶呢?还是两种菌株,分别产这高温蛋白酶和淀粉酶?要是分别筛选,就加淀粉为为唯一碳源,从泥土中选取震动培养,然后涂这种平板,高温培养,要是有菌株出现,那么就是目的菌株。蛋白酶也是这样的。 不明白私下聊。我很愿意回答生物方面的问题。我qq1663783050
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