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我做的植物SSR引物设计,现在发现我的SSR引物PCR反应后,用PAGE电泳的结果会出现多条带,正常吗?为什么?
发布于2022-02-16 08:30:50
2
个回答
网友回答
2022-02-16
验证你的
引物
是否特意:首先,再设计完一对因为后,要去NCBI上blast一下,看看是否会有很多条产物出现,如果产物单一的是目的片段,基本可以确定你的引物是特意的了。 另外,如果PCR反应后出现多条条带,有可能是
退火温度
低,导致产物不特意,你可以试试
梯度PCR
,先确定最佳的退火温度。当然有些基因比较不容易扩增,无论什么温度,基本上出现的都是很多条带。比较正常。目的片段3K以上这个情况还是比较常见的。
网友回答
2022-02-16
前提是看是否有条带,条带是否够亮够特异,然后主要是看有没有多态了
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