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标准曲线法与其他蛋白质含量测定方法比较,有何优缺点
发布于2022-01-13 20:12:02
2
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网友回答
2022-01-13
标准曲线
法又称校准曲线法,做法是将贮备标准液稀释为所需要的标准系列,用零浓度调仪器零点后,依次由低到高浓度
测量标准
液的
吸光度
(或峰高、面积),同 时测定样品和样品空白的吸光度(或峰高、面积),在坐标纸上以标准液浓度为横坐标,对应的吸光度为
纵坐标
,绘制标准曲线。它一般适用于已知样品的基本成分 和标准液的基本成分相接近的样品。 标准加入法是分别在数份相同体积样品液中加入不等量的标准液,一定要有一份相同体积样品液中加入 的标准液为零,按照上面绘制标准曲线的步骤测量吸光度(或峰高、面积),在坐标纸上以加入的标准液浓度为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,用
外推法
(延长标准曲线和横坐标相交的数的绝对值)就可得到样品液浓度。它一般适用于组份较复杂的未知样品,能消除一些基本成份对测定的干扰,但对测定的未 知成分含量要粗略估计一下,加入的标准液要和样品液浓度接近, 优缺点:准确度较高,但是比较麻烦,要做很多
标准溶液
网友回答
2022-01-13
优点:是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多;重复性好.颜色深,析光度.缺点:是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多.
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