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测定土壤过氧化氢酶时要求低温是因为过氧化氢酶在低温下才会有活性，才会测得准确。
过氧化氢酶（CAT）是一种酶类清除剂，又称为触酶，是以铁卟啉为辅基的结合酶。它可促使H2O2分解为分子氧和水，清除体内的过氧化氢，从而使细胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御体系的关键酶之一。CAT作用于过氧化氢的机理实质上是H2O2的歧化，必须有两个H2O2先后与CAT相遇且碰撞在活性中心上，才能发生反应。H2O2浓度越高，分解速度越快。
检测
进行中的过氧化氢酶检测，可以观察到气泡。
过氧化氢酶检测是微生物学家鉴定细菌种类的主要的三种检测手段之一，即用过氧化氢来检测过氧化氢酶是否存在。假如细菌中含有过氧化氢酶，则在过氧化氢溶液中加入少量细菌提取物就能观察到氧气气泡生成。
有气泡生成，则该菌被认为是呈“过氧化氢酶阳性”。如staphylococcus和micrococcus。没有，则该菌被认为是呈“过氧化氢酶阴性”。如streptococcus和enterococcus。 虽然过氧化氢酶检测无法鉴定特定生物体，但与其他检测方法结合，它可以有效地帮助诊断。
此外细菌中是否存在过氧化氢酶，还取决于细胞生长条件和所使用的培养基。
计算公式：
c1= （25ml*c2*25ml）/1ml*1g
25ml分别代表培养时的溶液和做分光光度计时稀释的倍数，1ml为稀释一毫升，1g为土样称取的量，有相应的改变你可以在换算一下
整理后得c1=625*c2
c1的单位为（mg/g）*24h，因为本试验培养24小时，可以写成（mg/g）*d
c2为比色所测得结果
计算：转化酶活性以1g 土壤在30℃或37℃时，24 h释放出的葡萄糖mg数表示。
过氧化氢酶活性的测定：称5g过1mm筛风干土，置于100ml三角瓶中，注入40ml蒸馏水和5ml 0.3%过氧化氢溶液，振荡(120次/分钟)20分钟。随即加入3n硫酸5ml，稳定未分解的过氧化氢并终止反应。用慢速型滤纸过滤瓶中的土壤悬浊液，吸取25ml滤液，用0.01n高锰敏钾滴定至淡粉红色终点。
过氧化氢酶的单位为(0.1 mol/l kmno4) ml/g